26、简述真核生物RNA的结构特点。

答：①真核生物RNA一般由′端帽子结构（7G）、5′端不翻译区、翻译区（编码区）、3′端不翻译区、和3′端聚腺苷酸Py（A）构成。②真核细胞的RNA多是单顺反子。③分子中出7G构成帽子外，常含有其他修饰核苷酸，如6A等。

27、试述蛋白质合成的一般过程。

答：在真核生物中，RNA在细胞核内形成后，穿过核膜孔进入细胞质。核糖体附着其上，从它的5′端开始阅读，即从RNA5′端向3′端移行，实现蛋白质的合成。其基本过程如下：①tRNA携带氨基酸。②核糖体“阅读”密码子，氨基酸连成多肽链。多肽链合成的起始：核糖体的大、小亚基、RNA上的密码子相适应，新的氨基酸不断被相应特异的tRNA运至核糖体的受位，形成肽链。同时，核糖体从RNA的5′端向3′端不断移位以推进翻译过程。肽链延长阶段需要称为延长因子的蛋白质，GTP，Mg2+与K+的参与。肽链合成的终止：多肽链合成完成，并且“受位”上已出现终止信号，即转入终止阶段。终止阶段包括已合成完毕的肽链被水解释放，以及核糖体与tRNA从RNA上脱落的过程。这一阶段需要GTP与一种起终止作用的蛋白质因子——释放因子（终止因子，RF）的参与。

28、简述转基因克隆技术的基本步骤。

答：①构建基因载体：按分子克隆方法构建含有目的基因和新霉素抗性标记基因的（融合基因）表达载体。②体细胞的培养和基因转染：对体细胞进行传代培养。然后将传代细胞与构建基因混合，用电转移法转染细胞。再用含有新霉素的培养基进行筛选，挑选出成活的细胞继续培养，形成转基因细胞系。③转染细胞的鉴定：用PCR分析或Sthrn杂交确认细胞中含有目的基因。④核移植与克隆：经核移植操作与去核卵母细胞融合，按常规进行克隆。

29、简要回答现代生物工程的形成和发展。

答：现代生物工程是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志，从传统生物技术发展而来。现代生物技术是用“细胞与分子”层次的微观手法来进行操作，不同于传统生物技术以“整体”动物、植物或微生物的饲养、交配或筛选方式。1944年Avry阐明了DNA还遗传信息的携带者。1953年沃森和克里克提出了DNA双螺旋结构模型。20世纪70年代初建立起来的DNA重组技术生命发展中的又一重大突破，诞生了基因工程，它大大推动了分子生物学与分子遗传学的飞速发展。以基因工程为核心，带动蛋白质工程、发酵工程、细胞工程的发展，在医药工业、农业生产等方面得到广泛的应用。

30、试述转基因动物的概念、原理及应用。

答：转基因动物是指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内，并能稳定传代的一类动物。它的特点是：分子及细胞水平操作，组织及动物整体水平表达。基本原理：将目的基因或基因组片段用显微注射等方法注入实验动物的受精卵或着床前的胚胎细胞中，使目的基因整合到基因组中，然后将此受精卵或着床前的胚胎细胞再植入受体动物的输卵管或子宫中，使其发育成携带有外源基因的转基因动物，人们可以通过分析转基因和动物表型的关系，揭示外源基因的功能；也可以通过转入外源基因培育优良的动物品种。应用：建立用于研究外源基因表达调控体系；建立医学中常用的疾病模型；培育动物新品种；药理学和药用蛋白的生产研究。

31、简述基因治疗的策略。

答：①基因置换或称基因矫正：特定的目的基因导入特定的细胞，通过定位重组，让导入的正常基因置换基因组内原有的缺陷基因，不涉及基因组的任何改变。②基因天价或称基因增补：通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。③基因干预：采用特定的方式抑制某个基因的表达，或者通过破坏某个基因而使之不能表达，以达到治疗疾病的目的。④基因标记：基因标记实验是基因治疗的前奏，并不在于直接治疗疾病而是期望能够提供有关正常细胞生物学和疾病病理方面的信息。